今天我们要介绍一个让蛋白质"自曝行踪"的黑科技——NanoBiT®蛋白互补技术!这个技术就像给蛋白质装上"GPS定位",让我们能在活细胞里实时"偷窥"蛋白质之间的秘密约会!
蛋白质是细胞里的"社交达人",它们无时无刻不在进行着复杂的"社交活动"——蛋白质相互作用(PPIs)。这些互动几乎参与了细胞所有的生命活动,从信号传导到疾病发生,都离不开它们的"社交网络"。
但传统的"监视"方法(比如Pull-down或免疫共沉淀)就像是在犯罪现场提取指纹——只能看到事后痕迹,看不到案发过程。而NanoBiT®技术则像安装了实时监控摄像头,让我们能亲眼目睹蛋白质们的"约会现场"!
NanoBiT®技术的核心是一个聪明的"分体式萤光素酶"系统。它把NanoLuc®萤光素酶拆成两半:
大块头LgBiT(18kDa)
小不点SmBiT(只有11个氨基酸)
这两个小零件分别"粘"在我们想研究的两个蛋白质上。当这两个蛋白质相遇时,LgBiT和SmBiT就会像拼图一样完美结合,重新组成完整的萤光素酶,发出明亮的生物荧光!
这就像给两个特工装上对讲机——只有当他们碰头时,对讲机才能正常工作,向我们发送信号!

实时直播:直接在活细胞中观察蛋白质互动,不破坏细胞环境。
超高灵敏度:信号比传统方法强100-1000倍!
超小体积:标签蛋白极小,几乎不影响蛋白质正常活动。
可逆互动:能观察到蛋白质"分手"和"复合"的动态过程。
操作简单:商品化解决方案,开箱即用。
Split 技术 (传统方法) NanoBiT技术

构建"特工装备":把LgBiT和SmBiT分别融合到目标蛋白上。
派遣特工:将构建好的载体转染进活细胞。
安装监控:加入Nano-Glo®活细胞检测试剂。
接收信号:用发光检测仪记录蛋白质"约会"信号。

这项技术在多个领域大显身手:
想开始你的蛋白质"侦探"之旅?这些装备不能少:

NanoBiT®技术就像给科学家配了一副"蛋白质互动眼镜",让我们第一次能够实时、动态地观察活细胞中蛋白质的"社交生活"。无论是基础研究还是药物开发,这项技术都正在打开一扇全新的大门!