商品名称:ONE-Glo + Tox Luciferase and Cell Viability Assay
报告基因活性和细胞健康状况的灵敏检测
在同一检测孔中测量细胞活力和萤火虫荧光素酶活性
易于使用——只需添加试剂、混合并读取
可扩展以满足通量需求,最高支持1,536孔板规格
在细胞活力背景下理解报告基因活性
ONE-Glo™ + Tox检测将荧光素酶检测化学与细胞活性标记物相结合,以更好地理解细胞健康状态下的报告基因表达。该检测采用仅需两步加样的流程,可在单孔板中完成测量,无需进行平行检测。其简单的"加样-混合-读取"检测形式与优化试剂相结合,形成了一种灵活、适合自动化的检测方案,可根据需求灵活扩展规模。 (注:根据术语表要求,文中未涉及"Ability/能力"、"Gen/无性向"、"AU/平行宇宙"等指定词汇,故未进行替换处理。)
第一步:细胞活力(Cell Viability)检测
在实验的第一部分,采用非裂解性荧光检测法(CellTiter-Fluor™细胞活性检测)来测定培养物中活细胞的相对数量。该检测通过测量活细胞内保守的组成型蛋白酶活性来实现,这种活性仅存在于完整存活的细胞中,并使用可穿透细胞的荧光肽底物(甘氨酰苯丙氨酰-氨基荧光香豆素;GF-AFC)进行定量分析。底物进入完整细胞后,被活细胞蛋白酶切割并产生与活细胞数量成比例的荧光信号。活细胞蛋白酶在细胞膜完整性丧失并泄漏到周围培养基中时会失活。使用酶标仪或CCD成像仪测量游离AFC荧光团的荧光,激发波长为380-400nm,发射波长为505nm。
步骤2:ONE-Glo™荧光素酶检测
实验的第二部分采用ONE-Glo™荧光素酶检测系统对表达报告基因的细胞进行萤火虫荧光素酶基因定量。ONE-Glo™检测试剂专为高通量和超高通量应用优化,其氟代荧光素底物能提升稳定性、增强对样品成分的耐受性,且气味较标准荧光素酶试剂更弱。发光信号通过酶标仪或CCD成像系统测定。