优化RNA干扰检测的载体
监测与报告基因融合的目标基因表达变化;荧光素酶活性降低与RNA干扰相关。
专为终点裂解检测设计
便捷发光信号监测RNA干扰效果
psiCHECK™-2载体专为RNA干扰(RNAi)的定量快速优化而设计,可通过与报告基因融合的目标基因表达变化进行监测。海肾荧光素酶被用作主要的报告基因,而目的基因则被克隆至位于多个克隆区域下游的位置。海肾翻译终止密码子。通过合成siRNA针对目标基因启动RNA干扰过程,导致融合mRNA发生切割并随后降解。通过测量……的减少海肾活性检测为监测RNAi效应提供了一种便捷方法。
与其他融合方法(如GFP或flag标签)相比,海肾荧光素酶法提供了更便捷、快速的定量检测,且灵敏度更高。psiCHECK™-2载体包含第二个报告基因——萤火虫荧光素酶,专为终点裂解实验设计。该载体引入萤火虫荧光素酶可实现数据归一化。海肾荧光素酶表达,获得稳健且可重复的结果。
psiCHECK™载体在RNAi优化中的优势
便捷RNAi靶点评估。
定量检测使用普通发光仪即可完成,无需购置昂贵设备。
协议允许在活细胞或粗制细胞裂解物中进行测量。
无需繁琐耗时实验或等待表型变化。
不必担心使用psiCHECK™-2载体时的转染标准化