商品名称:CheckMate/Flexi Vector Mammalian Two-Hybrid System
研究哺乳动物蛋白质相互作用、表达及翻译后修饰
确认、验证并研究可疑的蛋白质或结构域相互作用
为基于细胞的检测生成稳定的细胞系
支持哺乳动物蛋白质的原位表达及翻译后修饰研究
CheckMate™/Flexi®系统专为确认、验证及研究两种蛋白质或结构域间疑似相互作用而设计,同时可用于生成稳定细胞系以进行基于细胞的检测。该系统支持在模拟天然细胞环境条件下实现哺乳动物蛋白表达及翻译后修饰研究。®该系统模仿酵母双杂交系统设计,其中目标蛋白X与DNA结合域融合,另一蛋白Y则与转录激活域融合。
该系统依赖于三种共转染至哺乳动物细胞的质粒,每种质粒均具有独特功能。pFN10A(ACT)Flexi®载体在克隆位点上游含有单纯疱疹病毒VP16转录激活结构域,pFN11A(BIND)Flexi®载体则在克隆位点上游含有酵母Gal4 DNA结合结构域。此外,pFN11A(BIND)Flexi®载体还表达斑点海肾由SV40启动子调控的荧光素酶,用于校正转染效率差异。第三个载体为pGL4.31[luc2P/Gal4UAS/Hygro]载体,包含五个位于最小TATA盒上游的Gal4结合位点,该TATA盒又位于萤火虫荧光素酶基因上游,该基因作为蛋白质X与Y相互作用的报告基因。
这些质粒可用,并可单独从系统中订购。
该系统与原始的CheckMate™哺乳动物双杂交系统不同,其载体兼容Flexi®载体系统,可实现定向克隆,并能快速、高效、高保真地在多种Flexi®载体间转移蛋白质编码区。
应用
确认、验证并研究两种蛋白质或结构域之间疑似存在的相互作用。