商品名称:Proteasome-Glo 3-Substrate Cell-Based Assay System
均质发光法检测培养细胞中的蛋白酶活性
简单的“add-mix-measure”协议
糜蛋白酶样、胰蛋白酶样和半胱天冬酶样活性数据直接来自细胞环境
试剂加入后10-30分钟内出结果
测量培养细胞中的蛋白酶活性
均质、发光检测法,可分别测量培养细胞中与蛋白酶体复合物相关的糜蛋白酶样、胰蛋白酶样和半胱天冬酶样蛋白酶活性,以获得更具生物学相关性的结果。这些检测方法还可用于筛选抑制剂文库并监测细胞中蛋白酶体调控的蛋白质降解过程。Proteasome-Glo™细胞检测系统提供发光型蛋白酶体底物,其缓冲液经过优化,可实现细胞透化、蛋白酶体活性和荧光素酶活性的最佳平衡。以“添加-混合-测量”形式添加Proteasome-Glo™细胞检测试剂后,蛋白酶体会切割底物,并通过荧光素酶反应快速产生发光信号。
用于监测特定蛋白酶活性的三种发光底物包括:Suc-LLVY-氨基荧光素用于胰凝乳蛋白酶样活性,Z-LRR-氨基荧光素用于胰蛋白酶样活性,Z-nLPnLD-氨基荧光素用于半胱天冬酶样活性。每种发光底物均添加至针对其特定蛋白酶体活性和荧光素酶活性优化的缓冲体系中。将试剂加入培养细胞后,蛋白酶体会切割底物释放荧光素,荧光素随即被荧光素酶消耗,产生与酶活性或抑制程度相关的"辉光型"发光信号。26S蛋白酶体是一种存在于所有真核细胞中的2.5MDa多蛋白复合体。
Proteasome-Glo™细胞三底物检测系统包含三种均质生物发光检测法,可在细胞水平测量蛋白酶体的三种蛋白水解活性(每种检测亦可单独使用)。其简化操作流程能最大限度减少操作步骤,并实现自动化检测。发光检测法可规避固有荧光背景信号干扰,提供优异的信噪比读数。该检测体系可微型化至384孔板规格。