与哺乳动物细胞共转染时可增强蛋白表达
在瞬时转染蛋白质表达载体的细胞中提高翻译起始水平
可用于多种细胞系
pAdVAntage™载体与哺乳动物细胞共转染可通过增强翻译起始作用,显著提高多种细胞类型的瞬时蛋白表达水平。在293和HeLa细胞系中,与单独转染荧光素酶载体相比,联合转染pAdVAntage™载体可使荧光素酶表达量提升至少十倍。
用表达载体转染哺乳动物细胞常导致目的蛋白表达欠佳。转染过程中产生的双链RNA(dsRNA)被认为会激活双链RNA激活抑制剂(DAI)——这是宿主细胞抗病毒防御系统中涉及的多种酶之一。DAI通过磷酸化翻译起始因子eIF-2来中止翻译过程,进而抑制蛋白质合成。
然而,DAI的翻译抑制可通过腺病毒相关I型RNA(VAI RNA)来克服。该RNA由RNA聚合酶III在与pAdVAntage™载体共转染后产生。VAI RNA与DAI结合,阻止其激活,从而实现翻译和蛋白质表达。