商品名称:SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005
SimpleChIP® Plus 酶促染色质免疫沉淀试剂盒(磁珠)#9005 是一个完整的ChIP试剂盒。它包含从细胞或组织样本中进行多达30次染色质免疫沉淀所需的缓冲液和试剂,并且针对每沉淀4 X 106个细胞或每沉淀25毫克的组织进行了优化。完整的检测可以在短短两天内完成,并且可以轻松地根据需要的细胞或组织样本数量进行扩展或缩减。该试剂盒与ChIP-seq兼容。
细胞或组织用甲醛固定并裂解,通过微菌核酸酶部分消化来切割染色质,以获得1到5个核小体的染色质片段。染色质的酶切片段化比超声处理温和得多,消除了超声处理过程中由于超声功率和染色质乳化差异导致的染色质片段化不完全或由于蛋白质变性和降解导致的抗体表位丢失的问题。使用经ChIP验证的抗体和ChIP级蛋白G磁珠进行染色质免疫沉淀。在蛋白质-DNA交联逆转后,使用DNA纯化离心柱纯化DNA。允许轻松高效地回收DNA并去除蛋白质杂质,无需使用酚/氯仿提取和乙醇沉淀。免疫沉淀过程中特定DNA序列的富集可以通过多种方法进行分析,包括标准PCR、定量实时PCR、或ChIP on chip的扩增、测序或克隆技术。该试剂盒与ChIP-seq兼容。
SimpleChIP® Plus 套件还提供了重要的对照,以确保 ChIP 实验的成功。ChIP 套件 #9005 包含一个阳性对照组 Histone H3 抗体、一个阴性对照组 Normal Rabbit IgG 抗体和用于检测人类和小鼠核糖体蛋白 L30 (RPL30) 基因的 PCR 引物组。Histone H3 是染色质的核心成分,并且在整个基因组中与大多数 DNA 序列结合,包括 RPL30 基因座。因此,Histone H3 抗体提供了一个通用的阳性对照,应该能够富集几乎任何检查的基因座。